IVF – in vitro fertilizacija pri kravah

In vitro fertilizacija (oploditev zunaj telesa)
Komercialna uporaba umetnh osemenitev (UO) in konvencionalnega prenosa zarodkov (ET) v reprodukcijskih sistemih goveda je v preteklih letih omogočila hitre genetske izboljšave. Vendar je bilo pri teh tehnologijah doseženih le malo pomembnih napredkov, zaradi česar so govedorejci raziskali možnost, da bi v svoj arzenal reprodukcijskih orodij dodali oploditev in vitro (IVF). Ker so stroški in tehnične omejitve, povezane z IVF, nekoč ovirali njeno praktično uporabo v velikem obsegu, je IVF prej našla svojo nišo kot zadnja možnost za pridobitev dragocenega genetskega materiala od darovalke, ki se je spopadala z neplodnostjo. Vendar so danes številne tehnične omejitve odpravljene, kar je omogočilo, da je IVF postala ekonomsko upravičena in
močno orodje, ki ga lahko napredni živinorejci dodajo v svojo zbirko reprodukcijskih orodij.

Razumevanje postopka IVF

Splošna predpostavka IVF se ne razlikuje od konvencionalne ET, pri kateri se ustvarijo številni vitalni zarodki iz genetsko boljših krav darovalk za prenos v krave prejemnice. Zaradi načina pridobivanja zarodkov je IVF edinstveno in močno orodje. Pri IVF se darovalki odvzamejo neoplojene jajčne celice, ki dozorijo in se oplodijo v nadzorovanem laboratoriju, preden se prenesejo v prejemnice ali zamrznejo.

Zbiranje jajčnih celic

Za odvzem jajčnih celic veterinar darovalki aplicira epiduralno anestezijo, da se lahko jajčnik stabilizira z rektalno palpacijo. Nato se vaginalno vstavi aspiracijsko držalo, sestavljeno iz ultrazvočne sonde in vodila igle, s katero se manipulira, da se jajčnik prikaže. Ultrazvok veterinarju omogoča, da vizualizira s tekočino napolnjene folikle na jajčniku, tako da se lahko igla (ki se nahaja v vodilu igle) vstavi v vsak folikel. Vsebina vsakega folikla, vključno z jajčnimi celicami, se skozi iglo aspirira in zbere v steklenički (viali). Vsebina viale se nato pregleda skozi filter, kar omogoča izolacijo oocitov in izpiranje v posodo. Z mikroskopom se oociti vzamejo iz posode, preštejejo in razvrstijo glede na kakovost.

Proizvodnja zarodkov

Naslednjih osem dni so jajčne celice nameščene v laboratoriju v pogojih, ki so posebej zasnovani tako, da posnemajo goveje reproduktivno okolje. V prvih 22-24 urah oociti zorijo v inkubatorju, da se pripravijo na oploditev. Nato se oocitom doda seme in omogoči oploditev. Oplojene jajčne celice se sedem dni gojijo v inkubatorju, da se lažje razvijejo v zarodke. Na tej točki se oceni kakovost zarodkov in se pripravijo za svežo presaditev v krave prejemnice ali za zamrznitev. Poleg tega se lahko zarodki IVF pošljejo čez noč, če je zaželen svež prenos na oddaljeno lokacijo.

Prednosti IVF

Premagovanje reproduktivnih anomalij
V preteklosti je bila IVF najpogosteje uporabljena pri darovalkah, ki niso bile uspešni pri konvencionalnem programu ET. Ne glede na to, ali je bila darovalka neproduktivna zaradi fizične nepravilnosti reproduktivnega trakta (npr.: brazgotinjenje, neprehoden maternični vrat itd.), nagnjena k pretirani stimulaciji, stimulacija ni bila uspešna ali je proizvedla številne neoplojene jajčne celice, je mogoče številne od teh nepravilnosti odpraviti z uporabo IVF.

Brez hormonov, manj dela
Oploditev in vitro ponuja izvedljivo alternativo standardnim superovulacijskim protokolom, saj je mogoče krave darovalke s sprejemljivimi rezultati aspirirati brez uporabe superovulacijskih zdravil, kot je folikle stimulirajoči hormon (FSH). To ne omejuje le stroškov in količine potrebnih hormonov, temveč tudi odpravlja delo, ki je potrebno za dajanje zdravil, ugotavljanje gonitve in vzrejo krave darovalke za tradicionalno oploditev. Darovalko lahko aspiriramo skoraj brez pripravljalnega dela.

Breje darovalke
Krave ustvarjajo folikle tudi med brejostjo, vendar je zbirka genetskega materiala, ki se nahaja v teh foliklih, nedostopna za običajne tehnologije izpiranja. Ker aspiracija jajčnih celic za IVF ne zahteva uporabe hormonov niti ne posega v maternični vrat ali maternico, je mogoče jajčne celice odvzeti, ne da bi prekinili obstoječo brejost. Na splošno je mogoče kravo darovalko varno aspirirati od sedmega do 100. dneva brejosti. Aspiracija se lahko podaljša še dlje v času brejosti, če so jajčniki dostopni veterinarju.

Krave/telice, ki niso v ciklusu
Podobno kot pri brejih kravah, tudi pri kravah in telicah, pri katerih ni ciklusa, nastajajo kohorte foliklov, čeprav ne kažejo estrusa. Ti folikli se lahko odvzamejo za ustvarjanje zarodkov pri kravah kmalu po telitvi in pri telicah, preden dosežejo puberteto. Oocite je mogoče pridobiti tudi od dragocenih krav pred smrtjo ali tik po njej.

Maksimizirajte uporabo semena
Pri umetni osemenitvi ali konvencionalni ET morajo spermiji prepotovati celotno dolžino kravjega reproduktivnega trakta, da bi oplodili jajčne celice. Pri IVF se spermiji namestijo neposredno v majhno posodo z jajčnimi celicami. Tako je za IVF običajno potrebno manj semena, ena sama slamica semena pa lahko oplodi jajčne celice več darovalcev. To je še posebej koristno, kadar se uporablja redko, drago ali seksirano seme. Majhna količina semenskih celic, ki je potrebna za IVF, omogoča tudi edinstveno uporabo za tiste r, kejce, ki želijo zarodke po spolu. Nekatere (vendar ne vse) konvencionalno zamrznjene semenčice je mogoče za Gender Select™ sortirati v obratni smeri (tj.: ena slamica zamrznjene semenčice se odtaja in nato sortira po spolu), da se pridobi želeni spol. To je lahko koristno, kadar seksirano seme ni na voljo na trgu.

Več plemenjakov
Ker oploditev jajčnih celic poteka v nadzorovanem okolju, je mogoče iz ene zbirke darovalk pridobiti več paritev (ob predpostavki, da se pridobi zadostno število [≥ 20] kakovostnih jajčnih celic). Oocite ene same darovalke bi preprosto ločili v posamezne vdolbinice, kar bi omogočilo uporabo semena več plemenjakov. Če so oociti za oploditev ločeni, je mogoče enostavno ugotoviti starševstvo potomcev, ne da bi bilo potrebno genetsko testiranje.

Kratek interval med postopki
Donorke je običajno mogoče za IVF aspirirati vsaka dva tedna. Odvisno od produktivnosti posamezne darovalke se lahko z IVF proizvede več zarodkov kot s konvencionalno ET. Oploditev in vitro lahko dopolnjuje tudi konvencionalni program ET, saj omogoča, da se darovalke med posameznimi izpiranji aspirirajo.

Pomembni vidiki IVF

Proizvodnja zarodkov
Posamezni rezultati IVF so različni in so odvisni od številnih dejavnikov, med drugim od starosti, pasme, zdravstvenega stanja in prehranske oskrbe ter kakovosti semena. Na splošno velja, da se pri govedu v povprečju pridobi približno 18-22 jajčnih celic na aspiracijo. Od teh jajčnih celic se jih približno 30-35 % razvije v prenosljive/zamrzljive zarodke.

Stopnja brejosti
Čeprav uporabljamo napredne tehnologije za posnemanje kravjega reproduktivnega trakta v laboratoriju, je najboljše okolje za ustvarjanje in dozorevanje govejih zarodkov še vedno v samem reproduktivnem traktu krave. Zato zarodki, pridobljeni z IVF, niso tako močni kot zarodki, pridobljeni s konvencionalno metodo, zato je treba pričakovati manjše število brejosti. V dobro upravljanih čredah prejemnic je značilna 55- do 70-odstotna stopnja brejosti pri svežem prenosu. Stopnja brejosti pri zamrznjenih zarodkih IVF je na splošno za 10-15 % nižja od konvencionalno zamrznjenih zarodkov.

Poškodbe jajčnikov
Zaradi polinvazivne narave pridobivanja jajčnih celic so proizvajalci lahko zaskrbljeni zaradi poškodb ali brazgotin na jajčniku. Bodite prepričani, da je jajčnik presenetljivo regenerativen organ in da je brazgotin malo ali nič, kadar pridobivanje jajčnih celic opravijo naše usposobljeno osebje.

Sindrom velikega potomstva (LOS)
Ta okvara se občasno pojavi pri teletih, pridobljenih z IVF, zaradi manipulacije z zarodkom na začetku njegovega razvoja. Zelo se trudimo, da bi te moteče učinke čim bolj zmanjšali. LOS je bil na primer delno pripisan uporabi seruma v mediju. Da bi omilili to težavo, vsi naši mediji ne vsebujejo seruma.

Vas zanima, ali želite v svoj nabor reproduktivnih orodij dodati IVF? Tu smo, da vam pomagamo razviti načrt. Zavedamo se, da IVF ni primeren za vsako kravo ali vsako situacijo, zato bomo skupaj z vami ugotovili, katere darovalke so najboljše kandidatke za IVF, da bi povečali svojo reproduktivno učinkovitost. Pokličite nas in nam dovolite, da vam še danes pomagamo z našo neprekosljivo storitvijo za stranke!